84 poster,  4 ενότητες,  362 συγγραφείς,  122 ιδρύματα

ePostersLive® by SciGen® Technologies S.A. All rights reserved.

ΑΑ 05
ΑΥΞΗΜΕΝΗ ΣΥΧΝΟΤΗΤΑ ΠΕΡΙΦΕΡΙΚΩΝ Β ΛΕΜΦΟΚΥΤΤΑΡΩΝ ΠΟΥ ΠΑΡΑΓΟΥΝ GM-CSF ΣΕ ΑΣΘΕΝΕΙΣ ΜΕ ΕΝΕΡΓΟ ΡΕΥΜΑΤΟΕΙΔΗ ΑΡΘΡΙΤΙΔΑ
Board 1 / Thu 9:20, 11 Dec 2014

Primary tabs

Βαθμολογία

No votes yet

Στατιστικά

816 reads

ΑΥΞΗΜΕΝΗ ΣΥΧΝΟΤΗΤΑ ΠΕΡΙΦΕΡΙΚΩΝ Β ΛΕΜΦΟΚΥΤΤΑΡΩΝ ΠΟΥ ΠΑΡΑΓΟΥΝ GM-CSF ΣΕ ΑΣΘΕΝΕΙΣ ΜΕ ΕΝΕΡΓΟ ΡΕΥΜΑΤΟΕΙΔΗ ΑΡΘΡΙΤΙΔΑ

Μακρή Αναστασία, Αδαμίδη Σοφία, Κουτσιανάς Χρήστος, Τσαλαπάκη Χριστίνα, Χατζηγιάννη Αιμιλία, Βασιλόπουλος Δημήτριος.

Μονάδα Κλινικής Ανοσολογίας-Ρευματολογίας, Β’ Παθολογική Κλινική και Ομώνυμο Εργαστήριο, Ιατρική Σχολή ΕΚΠΑ, Ιπποκράτειο ΓΝΑ, Αθήνα.

ΠΕΡΙΛΗΨΗ

Εισαγωγή: Ο αυξητικός παράγοντας των ουδετεροφίλων και μακροφάγων (GM-CSF) έχει ενοχοποιηθεί στην παθογένεια της ρευματοειδούς αρθρίτιδας (ΡΑ) ενώ πρόσφατα έχει ανιχνευθεί η παρουσία Β-λεμφοκυττάρων που παράγουν GM-CSF και συμμετέχουν στην φυσική ανοσία.

Υλικό και Μέθοδος: Συμπεριελήφθησαν 23 ασθενείς με ΡA (κριτήρια 2010 ACR/EULAR ), 11 ασθενείς-μάρτυρες (ψωριασική αρθρίτιδα n=4, οστεοαρθρίτιδα n=3, ANCA-αγγειϊτιδες n=2, σύνδρομο Sjögren n=1, γιγαντοκυτταρική αρτηρίτιδα n=1) και 10 υγιείς-μάρτυρες. Μονοκύτταρα περιφερικού αίματος (PBMC) ενεργοποιήθηκαν με PMA και ionomycin και στη συνέχεια, έγινε χρώση με ειδικά αντισώματα έναντι CD19 και ενδοκυττάριου GM-CSF (BioLegend). Η συχνότητα των CD19+/GM-CSF+ κυττάρων μετρήθηκε με κυτταρομετρία ροής (Partec) και συγκρίθηκε μεταξύ των διαφορετικών υποομάδων.

Αποτελέσματα: Ασθενείς με ΡA που δεν είχαν λάβει φαρμακευτική αγωγή και είχαν ενεργό νόσο συμπεριλήφθηκαν στη μελέτη (γυναίκες: 19, DAS28-CRP=5.53 ± 0.84, μέση διάρκεια = 14 μήνες, RF ή/και anti-CCP+ = 52%). Ο αριθμός των Β λεμφοκυττάρων (CD19+) δεν διέφερε μεταξύ των 3 ομάδων (6.9 ± 3.9% vs. 6.3 ± 3.5% vs. 8.4 ± 1.9%, p=NS). Διαπιστώθηκε στατιστικά αυξημένη έκφραση CD19+/GM-CSF+ κυττάρων σε ασθενείς με ΡΑ (4.4 ± 2.6%) σε σύγκριση με ασθενείς (1.1 ± 1.5%, p=0.0002) και υγιείς-μάρτυρες (0.2 ± 0.2%, p=0.00000002). Δεν διαπιστώθηκε διαφορά μεταξύ οροθετικών (RF/anti-CCP+, 4 ± 2.6%) και οροαρνητικών (4.8 ± 2.5%, p=0.347) ασθενών.

Συμπεράσματα: Αυτή είναι η πρώτη μελέτη που καταδεικνύει την παρουσία ενός εκπτυγμένου πληθυσμού περιφερικών Β λεμφοκυττάρων που παράγουν GM-CSF σε ασθενείς με ΡΑ. Ο παθογενετικός τους ρόλος αναμένεται να μελετηθεί περαιτέρω.

ΕΙΣΑΓΩΓΗ

- Ο αυξητικός παράγοντας των ουδετεροφίλων και μακροφάγων (GM-CSF) έχει ενοχοποιηθεί στην παθογένεια της ρευματοειδούς αρθρίτιδας (ΡΑ) και ερευνάται ως νέος θεραπευτικός στόχος.
- Σε πρόσφατες μελέτες σε ζωϊκά μοντέλα, έχουν ανευρεθεί B λεμφοκύτταρα που εκκρίνουν GM-CSF και συμμετέχουν στην φυσική ανοσία.

ΣΚΟΠΟΣ ΤΗΣ ΜΕΛΕΤΗΣ

Να καθοριστεί η συχνότητα των Β λεμφοκυττάρων που εκκρίνουν GM-CSF σε ασθενείς με ΡΑ σε συγκριση με υγιείς και ασθενείς μάρτυρες.

ΜΕΘΟΔΟΙ

- Συμπεριελήφθησαν:

  - 23 ασθενείς με ΡΑ

  - 11 ασθενείς-μάρτυρες

  - 10 υγιείς-μάρτυρες

- Μονοκύτταρα περιφερικού αίματος (PBMC’s) διεγέρθηκαν για 16 ώρες με Phorbol Myristate  Acetate (PMA) και ionomycin, παρουσία Brefeldin.
- Στη συνέχεια, έγινε χρώση κυττάρων με ειδικά αντισώματα έναντι επιφανειακού CD19  και ενδοκυττάριου  GM-CSF (BioLegend).
- H συχνότητα των CD19+/GM-CSF+ κυττάρων μετρήθηκε με κυτταρομετρία ροής (Partec).

ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ

Εικόνα 1. Συχνότητα περιφερικών CD19+GM-CSF+ κυττάρων.

- Αρχική διαλογή (gating) των λεμφοκυττάρων με βάση τις ιδιότητες SSC and FSC. Η έκφραση των CD19+GM-CSF+ κυττάρων φαίνεται στον πληθυσμό των CD19+ (R2).

Εικόνα 2. Έκφραση του % των B λεμφοκυττάρων (CD19+) σε υγιείς μάρτυρες (HC), ασθενείς-μάρτυρες (DC) και ασθενείς με ΡΑ.

- Το ποσοστό των Β λεμφοκυττάρων (CD19+) δεν διέφερε μεταξύ των τριών ομάδων (p=NS).

Εικόνα 3. Σύγκριση της έκφρασης των CD19+GM-CSF+ κυττάρων μεταξύ των διαφορετικών υποομάδων.

- Στατιστικά σημαντική αυξημένη έκφραση CD19+GM-CSF+ κυττάρων (4.4 ± 2.6) σε ασθενείς με ΡΑ, σε σύγκριση με ασθενείς-μάρτυρες (DC) (1.1 ± 1.5, p<0.001) και υγιείς-μάρτυρες (HC) (0.2 ± 0.2, p<0.001). Δεν διαπιστώθηκε στατιστικά σημαντική διαφορά μεταξύ ασθενών (DC) και υγιών μαρτύρων(HC, p=0.512).

Εικόνα 4. Συσχέτιση της CRP με την έκφραση  των CD19+GM-CSF+ κυττάρων.

- Το ποσοστό των B λεμφοκυττάρων  που εκφράζουν GM-CSF δεν συσχετίζεται με την CRP (p=0.926, Spearman correlation) ή τη δραστηριότητα της νόσου (DAS28, τα δεδομένα δεν παρουσιάζονται εδώ).

ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑΤΑ

- Η μελέτη αυτή καταδεικνύει για πρώτη φορά την παρουσία ενός εκπτυγμένου πληθυσμού περιφερικών Β λεμφοκυττάρων που παράγουν GM-CSF σε ασθενείς με ΡΑ σε σύγκριση με άλλες υγιείς ή ασθενείς μάρτυρες.
- Ο πιθανός παθογενετικός  ρόλος  αυτών των Β λεμφοκυττάρων στην ΡΑ αναμένεται να μελετηθεί περαιτέρω.